根治白癜风的方法 https://m-mip.39.net/baidianfeng/mipso_7375991.html作者：徐开*（医院病理科）
病理诊断的不断提高离不开病理技术的发展，虽然免疫组织化学技术及分子病理学诊断技术日趋成熟及广泛应用，使得病理学诊断水平及研究更加精准。但作为传统的染色技术——特殊染色，因实用性目前仍在病理学诊断及研究中占据重要的地位。
如何做好病理特殊染色？
特殊染色特点
1、染色时间短、操作简便：如：HP染色、VG染色、刚果红染色等；
2、染色方法具有一定特异性；
3、染色多重选择性：
①一种染色方法可染不同物质：
如PAS染色可显示糖原、真菌、黏液等；醛品红染色可显示弹性纤维、肥大细胞等
②一种物质可用多种染色方法：
如弹性纤维：可用醛品红法、间苯二酚碱性品红法等进行染色
③一种方法可用多种复染背景：
如：含铁血*素染色可用核固红、中性红、伊红复染；六胺银染色可用亮绿、橙*G复染。
4、试剂价格低廉（自配）；
5、实用性/不可替代性：
肝脏穿刺：Masson、Gomori、Perls；肾脏穿刺：PASM、PAS、Masson。
特殊染色局限性
1、组织细胞内成分复杂
①新型隐球菌：需做AB、PAS染色联合判别；②糖原：需做阴性对照方可进行判读。
2、组织的固定受限
石蜡切片：能较好的保存组织形态结构，但被检物会受到各种因素的影响或被破坏。
冰冻切片：能较好的保存各种酶、糖原、脂质等物质，但组织形态结构及阳性物质定位比较差。
做特染的组织往往都是经过甲醛固定，常规制片后的判断。难以再次做冰冻切片。
3、所选染色方法特异与否
特异性高，敏感性降低，假阴性升高。
4、染液用量小，保存时间短，一些液体容易失效。
如氢氧化银氨、核固红等
特殊染色室内质量控制
一、规定、制度
医院评审标准要求
二、对照的设立
对照设立是室内质量控制的首要条件。主要对照为：阳性对照、阴性对照、内对照。
主要是为了确保染色流程的准确，染色试剂的有效，最终证实染色结果的可靠。
1、阳性对照（最基本、有效的要素）：已知含有所染物质的组织。
日常工作中收集阳性对照组织。每批次染色加阳性对照组织。特别是病原微生物染色。
染色物质
阳性对照
胶原纤维、肌纤维
子宫平滑肌瘤
网状纤维、糖原
肝脏（穿刺）组织
弹力纤维
血管、脐带
肌纤维
横纹肌
病原微生物
HP、结核、真菌等阳性组织
淀粉样蛋白
声带息肉
含铁血*素
子宫内膜样囊肿
黏液物质
胃肠道黏膜
尼氏小体、神经元、神经纤维
脑组织
黑色素
恶性黑色素瘤
2、阴性对照：已知不含有所染物质的组织
一般而言，特染阳性对照结果比阴性对照结果更有意义和价值。
阴性结果可能缘于：
固定液的影响、物质本身含量低、组织处理过程的影响、染色方法不敏感等引起。
3、内对照
①组织自身物质：能用内对照的组织很少，主要靠阳性对照。
②消化/阻断对照：如PAS染色阳性：糖原、黏液
PAS+消化:阴性—糖原；PAS+消化:阳性—黏液。
三、染液的配制、保存
1、选择染色的方法：
①方法：特异性、敏感性（最为重要）；②流程：简单、快捷；③试剂：易购买；④结果：易保存。
2、染液的配制：
①选择合格的试剂（配好染液的关键）；②严格按照染液配制要求（《临床技术操作规范病理学分册》）进行配制。
3、染液配制后的验证：
①自行配制及购买试剂盒试剂均应做阳性、阴性对照；②验证有效后必须在试剂瓶上贴标签，标注清楚：试剂名称、配制日期、有效期；③改良染色法需经过大量病例来验证其准确有效性。
4、染液的保存：
①大部分染液2-8°C冰箱保存；②部分染液室温可保存较长时间：如苦味酸
③少许染液不可冰箱保存：如硫酸耐尔蓝；④部分染液需临用前配制：如VG。
5、染色试剂性质了解：
特殊染色试剂所使用有苦味酸、铬酸、硫酸、苯酚等许多有害物质，不仅要做好个人的防护，同时废液也不可随意倾倒。
四、染色中的控制
1、染色时间的掌握：
①染液使用的长短
如含铁血*素染色法中亚铁氰化钾液使用一段时间后变色应弃之，防止假阳性反应。
②染色温度
如PAS染色中高碘酸氧化的温度过高容易引起假阳性。
③切片厚度：一般为4-5um，Masson染色6um；尼氏小体染色6-9um。
如脱黑色素切片过厚，容易引起脱片。
2、染色中镜下的观察：
①Masson染色：磷钨酸分化时在镜下观察控制至肌纤维清晰为止。
②PASM染色：六胺银工作液中20min后镜下观察，镜下观察真菌或基底膜呈黑色终止，过染不可逆，无法修复。
③刚果红染色：分化时需镜下严格控制。
五、染色结果的判读
结合所选染色方法的表达结果、对照染色的结果、生物学形态判断。
1、所染阳性结果表达是否定位准确
2、组织阳性对照或内对照是否有效
3、判断结果应准确认识生物学形态
室内质控是保证结果准确性及稳定性不可缺少的重要环节。
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